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简要介绍基因克隆
作者:固拓多肽合成公司    发布于:2024年03月29日
摘要:基因克?。╣enecloning)它是将获取或生成的目的基因与具有独立复制能力的载体结合起来(vector)基因拼凑重组,引入受体细胞进行无性繁殖,然后产生新的基因分子。自20世纪70年代第一次DNA分子克隆重组以来,基因克隆已成为

基因克?。?/span>gene cloning)它是将获取或生成的目的基因与具有独立复制能力的载体结合起来(vector)基因拼凑重组,引入受体细胞进行无性繁殖,然后产生新的基因分子。

20世纪70年代第一次DNA分子克隆重组以来,基因克隆已成为生物学的关键技术,促进了生物分子学的进步,有效地促进了生物医学研究和产业的快速发展。

目的

基因克隆技术首先有助于准确分析目标基因的表达和调节,以及蛋白质的相互作用,包括调节元件、转录因子研究和非编码RNA研究;其次,它可以用于大规模生产难以获得的天然蛋白质;然后,它可以用来塑造和改造生物基因组结构,使其具有更大的应用价值。此外,近年来,随着基因测序和分析需求的增加以及新一代测序技术的发展(NGS)基因克隆技术在基因克隆技术的发展中也发挥着越来越重要的作用。

简要介绍基因克隆

归类

根据基因克隆的类型,可分为以下三类:

1、经典基因克隆需要限制性内切酶和连接酶。这也是目前应用最广泛的基因克隆方法,具有操作方便的特点。然而,由于内切酶酶切位点和连接酶效率的限制,它通常适用于小片段基因克隆。

2、需要装饰酶的基因克隆不需要限制性内切酶和连接酶,提高了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)克隆等基因克隆的灵活性和应用空间,具有操作简单、克隆效率高的特点。

3、需要重组酶的基因克隆不仅可以实现高通量克隆,还可以应用于原核生物、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等多系统表达载体,利用重组酶和特定识别点实现高效、高效的靶向克隆。目前,基于重组酶的基因克隆技术,如GateWay技术和Golden Gate技术等受到广泛关注。

方法

经典的基因克隆方法主要包括:目的性基因制备、限制性内切酶消化和切割目的性基因和媒介、使用DNA连接酶连接酶切割后的基因和媒介以及制备DNA重组体;将DNA重组体引入宿主细胞、选择克隆和识别以及宿主细胞中目标基因的扩展和表达。

写到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成业务:药物肽、临床肽、订书肽、淀粉肽、醛肽、环肽、二硫键搭桥多肽、穿膜肽、各种抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶联BSA和KLH抗原肽、各类酸修饰多肽、各种胺类化合物修饰多肽(苯胺、异戊胺、二乙胺)、各类荣光标记(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有产品仅限科研使用,不得用于人体,如有违反,后果自负。

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